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  • 資訊 > 政策法規(guī) > 《發(fā)酵茶及茶制品B族和G族黃曲霉毒素測定》征求意見

    2022-02-08 來源:食品機械設(shè)備網(wǎng)
    由安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)牽頭制定的《發(fā)酵茶及茶制品B族和G族黃曲霉毒素測定》(項目計劃編號:2020-2-47)地方標(biāo)準(zhǔn)已完成征求意見稿,為進一步完善標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)內(nèi)容,按照《安徽省地方標(biāo)準(zhǔn)管理辦法》(皖市監(jiān)發(fā)〔2019〕10號)、《地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂工作指南》的有關(guān)規(guī)定,現(xiàn)公開征求意見。

    由安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)牽頭制定的《發(fā)酵茶及茶制品B族和G族黃曲霉毒素測定》(項目計劃編號:2020-2-47)地方標(biāo)準(zhǔn)已完成征求意見稿,為進一步完善標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)內(nèi)容,按照《安徽省地方標(biāo)準(zhǔn)管理辦法》(皖市監(jiān)發(fā)〔2019〕10號)、《地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂工作指南》的有關(guān)規(guī)定,現(xiàn)公開征求意見。意見反饋郵箱:zhouyu121121@hotmail.com,截止時間2022年2月10日前。

     

      微生物菌群在發(fā)酵茶及含茶食品中普遍存在,正常的微生物菌群對發(fā)酵茶葉加工及品質(zhì)形成有重要作用。然而,在不良環(huán)境條件下,也容易造成有害霉菌污染,給發(fā)酵茶及含茶食品質(zhì)量安全帶來隱患。目前,全世界仍沒有針對于茶葉基質(zhì)的黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)檢測方法,不同檢測結(jié)果可比性小、爭議大。因此,制定茶葉基質(zhì)中的黃曲霉毒素檢測標(biāo)準(zhǔn)方法尤為重要。

     

      本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了發(fā)酵茶葉及茶制品中黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2(以下簡稱AFB1、AFB2、AFG1和AFG2)的測定方法。

     

      本標(biāo)準(zhǔn)第一法為雙柱凈化-高效液相色譜柱后光化學(xué)衍生法,適用于發(fā)酵茶葉及茶制品中AFB1、AFB2、AFG1和AFG2含量的測定。

     

      本標(biāo)準(zhǔn)第二法為雙柱凈化-液相色譜柱串聯(lián)質(zhì)譜法,適用于發(fā)酵茶葉及茶制品中AFB1、AFB2、AFG1和AFG2含量的測定。

     

      本標(biāo)準(zhǔn)章節(jié)由:范圍、規(guī)范性引用文件、方法原理、試劑材料、儀器設(shè)備、試驗步驟、分析結(jié)果計算與表述、精密度及其他等部分組成。其中“試驗步驟”和“結(jié)果和計算”是本標(biāo)準(zhǔn)的主要技術(shù)內(nèi)容。

     

      方法原理:

     

      試樣中的黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2,用乙腈-水溶液或甲醇-水溶液提取,提取液經(jīng)多功能凈化柱-免疫親和柱(MFC-IAC)凈化和富集,凈化液經(jīng)濃縮、定容和過濾后經(jīng)液相色譜分離,柱后光化學(xué)法衍生,經(jīng)熒光檢測器檢測。外標(biāo)法定量(HPLC-fld)。

     

      儀器和設(shè)備:

     

      1.高速粉碎機。2.超聲波/渦旋振蕩器或搖床。3.天平:感量0.01g和0.00001g。4.渦旋混合器。5.離心機:轉(zhuǎn)速 ≥6000 r/min。6.玻璃纖維濾紙:快速、高載量、液體中顆粒保留1.6 μm。7.固相萃取裝置(配15-50 mL免疫親和層析針筒)。8.空氣壓力泵。9.氮吹儀。10.液相色譜儀:配熒光檢測器。11.液相色譜柱。12.光化學(xué)柱后衍生器(適用于黃曲霉毒素柱后衍生)。13.黃曲霉毒素多功能凈化柱或固體萃取柱(以下簡稱MFC凈化柱)。14.免疫親和柱:AFB1 柱容量 ≥200 ng,AFB1柱回收率≥80%,AFG2的交叉反應(yīng)率≥80%(驗證方法依據(jù)GB5009.22-2016)。15.針筒式濾器(100 mL規(guī)格),可連接于空氣壓力泵。16.一次性針式過濾器:帶0.22 μm 微孔濾膜(所選用濾膜應(yīng)采用標(biāo)準(zhǔn)溶液檢驗,為有機相濾膜)。17.篩網(wǎng): 1 mm~2mm 試驗篩孔徑。

     

      樣品制備:

     

      液體樣品(茶水及含茶飲料)

     

      采樣量需大于500mL,對于袋裝、瓶裝等密封包裝樣品,需至少采集3個獨立包裝(同一批次或號),將所有液體樣品在一個容器中用混勻后,其中任意的100g(mL)樣品進行檢測。

     

      固體樣品(紅茶、黑茶、含茶食品)

     

      采樣量需大于1.0kg,用高速粉碎機將其粉碎,過篩,使其粒徑小于2mm,混合均勻后,以四分法縮分至100g,儲存于樣品瓶中,密封保存,供檢測用。

     

      樣品提?。?/span>

     

      液體樣品(茶飲料)

     

      取50 mL茶湯(精確至0.01 mL),然后加入50mL乙腈(精確至0.01mL)、7.5g氯化鈉(精確至0.01g),渦旋1 min,5000 r/min離心10 min,取上清,再加入50 mL乙腈重復(fù)提取,然后合并兩次上清,并加入2 g 氯化鈉(精確至0.01g),2 g硫酸鎂(精確至0.01g),5 g PVPP(精確至0.01g),2gPSA(精確至0.01g),5000 r/min離心10 min,取上清液備用。

     

      固體樣品(紅茶、黑茶、含茶食品)

     

      稱取5g試樣(精確至0.01g)于50mL離心管中,加入25mL乙腈-水溶液(84+16)或甲醇-水溶液(70+30),渦旋混勻,置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20 min,將提取液全部轉(zhuǎn)移至針筒式濾器,真空抽濾全部提取液于離心管中,在6000 r/min下離心10 min(或玻璃纖維濾紙過濾),取上清液備用。

     

      定性檢測:

     

      試樣中目標(biāo)化合物色譜峰的保留時間與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰的保留時間相比較,變化范圍應(yīng)在±2.5%之內(nèi)。

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