資訊 > 專家原創(chuàng) > 酸筍的微生物發(fā)酵及其風味形成
酸筍是竹筍經(jīng)微生物發(fā)酵制成的一種傳統(tǒng)發(fā)酵蔬菜,是螺螄粉、桂林米粉的“靈魂”配料,因其獨特的風味深受廣大消費者的喜愛。酸筍中微生物群落的構成及其代謝是酸筍生產(chǎn)的核心,酸筍中風味物質的含量和種類決定酸筍的品質,微生物是酸筍風味的主要來源,兩者在發(fā)酵過程中密切相關。
酸筍發(fā)酵菌群
乳桿菌屬是酸筍發(fā)酵中的優(yōu)勢菌屬,對酸筍產(chǎn)品的滋味和風味形成貢獻最大。乳酸桿菌被證實是許多發(fā)酵食品中產(chǎn)生有機酸尤其是乳酸和揮發(fā)性風味化合物的功能性微生物。研究表明,植物乳桿菌可提高發(fā)酵蔬菜中乳酸、酒石酸、檸檬酸以及谷氨酸、甘氨酸和蘇氨酸的含量。
在酸筍發(fā)酵過程中,乳桿菌扮演著重要角色,有助于提高發(fā)酵食品中揮發(fā)性風味物質的含量,乳酸桿菌在酸筍發(fā)酵過程中有利于酯類物質的合成。明串珠菌對酸筍中酯類物質的形成也發(fā)揮重要作用。乳桿菌不僅與揮發(fā)性風味物質相關,與乳酸單體產(chǎn)量也呈高度正相關, 特別是植物乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、戊糖乳桿菌和干酪乳桿菌等乳桿菌,這些微生物已被廣泛應用于食品發(fā)酵劑中,并成功改善了多種傳統(tǒng)發(fā)酵食品的質量。乳酸菌具有一定的功效作用。
目前,已有學者對酸筍中的功能性乳酸菌屬進行篩選分離和鑒定,發(fā)現(xiàn)一類抗氧化和降低膽固醇功效的乳酸菌,如發(fā)酵乳桿菌、布氏乳桿菌、戊糖乳桿菌和膿血乳桿菌。此外,還發(fā)現(xiàn)檸檬明串珠菌可以通過異型乳酸發(fā)酵產(chǎn)生甘露醇,從而賦予酸筍特殊的風味。
腸桿菌屬通常被認為是蔬菜發(fā)酵中的腐敗菌,但其與酸筍中特征醛類風味物質具有較強的正相關性,表明腸桿菌屬可能對酸筍揮發(fā)性風味物質的形成也至關重要。
腸桿菌雖然是一種食源性致病菌, 但對酸筍最終產(chǎn)品的食用安全性影響不大,主要有以下兩方面原因:一是腸桿菌屬僅在酸筍發(fā)酵初期大量存在,隨著酸度的增加而急劇下降,最終與發(fā)酵環(huán)境相脫離,其二是酸筍通常作為高溫烹飪原料食用,可有效降低微生物安全風險。
酸筍中的風味物質
風味主要通過揮發(fā)性風味物質和非揮發(fā)性風味物質共同體現(xiàn)。揮發(fā)性風味物質主要通過嗅覺器官感知,包括酚類、醇類、酸類、酯類、醛類、酮類、烯烴類等。非揮發(fā)性風味物質主要由人體味覺器官感知,包括糖、有機酸、氨基酸和多肽等物質。
1、揮發(fā)性風味物質
酸筍具有一種獨特酸臭味,是區(qū)別于其他發(fā)酵蔬菜的重要特征風味。目前,從酸筍中可檢測到醛類、酯類、苯酚類、醇類、酮類和呋喃等物質,其中醛類、酚類和酯類是酸筍中含量最高的揮發(fā)性風味物質,對酸筍風味起重要作用。
酚類化合物是一類具有刺激性氣味和特殊異味的化合物,閾值較低。對甲苯酚、甲酚、愈創(chuàng)木酚和 4-乙基愈創(chuàng)木酚是構成酸筍風味的重要物質。對甲苯酚是酸筍風味物質中含量最高的化合物,具有皮革臭和窖泥臭氣味,是濃香型白酒異味的特征風味物質,可能是酸筍特殊酸臭味的特征風味物質。
醛類物質主要為戊醛、3-甲基戊醛、3-甲基丁醛、己醛、反-2-壬烯醛、苯甲醛、3,4-二甲基苯甲醛和辛醛等,其中己醛具有生油脂和青草味,苯甲醛具有苦杏仁味,以及辛醛具有水果香味。
主要酯類物質包括甲酯、乙酸乙酯、乳酸乙酯、丙酸乙酯、甲酸乙烯酯、苯甲酸乙酯和丙酸丁酯等,其中丙酸乙酯具有濃厚的香蕉味,是清醬香型白酒主要風味物質之一,乙酸乙酯和乳酸乙酯是米香型白酒中重要揮發(fā)性風味物質。
此外,竹筍在自然發(fā)酵中還會產(chǎn)生吲哚類成分,這些物質是臭豆腐鹵水中的臭味物質,可能對酸筍獨特酸臭味的產(chǎn)生起重要作用。
2、非揮發(fā)性風味物質
酸筍中主要的非揮發(fā)性風味物質有氨基酸、有機酸和糖醇。
氨基酸主要影響著酸筍的滋味,分為甜味氨基酸、鮮味氨基酸、苦味氨基酸 3 類。游離氨基酸來源于蛋白質降解,不僅是重要的風味物質,也是一些重要揮發(fā)性風味物質的前體物質,與產(chǎn)品品質密切相關。游離氨基酸的含量和種類會直接影響酸筍的滋味。酸筍中主要呈味氨基酸有谷氨酸(glutamate,Glu)、天冬氨酸(aspartic acid,Asp)、丙氨酸(alanine Ala)和纈氨酸(valine,Val),其中Glu和Asp與酸筍中的鮮味相關,而Val與苦味相關。
有機酸是酸筍重要的風味成分,是酸味的主要來源。酸筍發(fā)酵過程中會產(chǎn)生多種有機酸,包括乳酸、乙酸、丁酸、草酸、琥珀酸、檸檬酸和蘋果酸,其中乙酸具有刺鼻的酸味,對酸筍的氣味具有一定的影響。乳酸和乙酸是主要的有機酸,且乳酸含量略高于乙酸,這與泡菜和酸菜等國內外傳統(tǒng)發(fā)酵蔬菜的研究結果相似。
除氨基酸和有機酸外,甘露醇是一種多元醇,同時也是一種被廣泛應用于食品工業(yè)的甜味劑。在蔬菜發(fā)酵過程中,乳酸菌通過異型發(fā)酵將果糖轉化為甘露醇,其獨特的清涼口感賦予了酸筍滋味提升的關鍵作用,豐富了其風味特性。
酸筍中風味物質的形成
酸筍的風味物質來源有2個途徑,一部分來源于竹筍原料,另一部分則來源于微生物代謝產(chǎn)生,其中微生物代謝是酸筍風味的主要來源途徑。
1、酸筍原料中的風味物質
酸筍中的風味與竹筍原料有著密切關系。竹筍自身含有的揮發(fā)性風味物質和固有的滋味物質,賦予了酸筍風味。而不同種類竹筍,自身的風味和營養(yǎng)成分也不盡相同。
研究表明,麻竹、綿竹、佯黃竹和雞爪竹等不同原料竹筍均具有豐富氨基酸,且單寧、三萜類、膳食纖維3種物質的含量也比較接近。但發(fā)酵后風味物質呈較大差異,雞爪竹筍和佯黃竹筍的酯類物質最多,而麻竹筍和綿竹筍的醇類物質最多。竹筍原料中本身含有的有機酸為草酸、蘋果酸和檸檬酸,在發(fā)酵過程中,其中的植物組織遭到破壞,導致細胞中的草酸、檸檬酸和蘋果酸慢慢滲透出來,因此對酸筍風味的形成起到重要作用。
2、酸筍發(fā)酵代謝風味的形成
酸筍發(fā)酵過程中,微生物利用碳水化合物、蛋白質和脂肪進行分解,如糖酵解/糖異生(EMP)、檸檬酸循環(huán)(TCA)、磷酸戊糖途徑(PPP)、丙酮酸代謝、脂肪酸生物合成、氨基酸代謝以及酯化作用等,將酸筍中蛋白質、脂肪等大分子物質水解產(chǎn)生相應的揮發(fā)性風味物質、有機酸以及氨基酸等一系列風味物質。
① 碳水化合物代謝
在酸筍發(fā)酵過程中,碳水化合物的催化代謝是一組復雜但且重要的生化分解反應,能夠形成特定風味和質構,為特殊風味的形成提供前體物。酸筍在發(fā)酵過程中不需添加輔料或僅添加少量的鹽,因此微生物生長代謝所需的碳源只能從竹筍原料中獲得。竹筍本身含有大量的淀粉和蔗糖,經(jīng)酶解后轉化成葡萄糖,并提供乳酸發(fā)酵所需的前體物。因此,碳水化合物的催化代謝在微生物中扮演著重要的能源來源角色。
② 有機酸的形成
明串珠菌、乳酸鏈球菌屬等主要進行同型乳酸發(fā)酵產(chǎn)生乳酸。單糖經(jīng)過己糖激酶催化生成6-磷酸葡萄糖酸,然后在磷酸果糖激酶作用下轉換成 1,6-二磷酸果糖,接著通過果糖-二磷酸醛縮酶作用生成3-磷酸甘油醛進行糖酵解(EMP)生成丙酮酸。最終乳酸菌產(chǎn)生乳酸脫氫酶催化丙酮酸轉化為乳酸。而魏斯氏菌屬和短乳桿菌等主要進行異型乳酸發(fā)酵,6-磷酸葡萄糖酸進入磷酸戊糖途徑(HMP)生成乙酰磷酸和 3-磷酸甘油醛,前者形成乙酸,后者經(jīng) EMP 和乳酸脫氫酶生成乳酸。
丙酮醛有3條代謝途徑可轉化為乳酸:(1)由乙醛酸直接合成乳酸;(2)由丙酮醛經(jīng)乙二醛還原酶生成乳醛,再由乙醛脫氫酶轉化為乳酸;(3)先轉化為(R)-s-內酯-谷胱甘肽,然后通過羥?;入赘孰乃饷缸饔棉D化為乳酸。蘋果酸是三羧酸循環(huán)(TCA)中的中間體,可由單糖經(jīng)過 EMP和TCA產(chǎn)生。且蘋果酸可以轉換為其他有機酸,如在富馬酸水合酶作用下將蘋果酸轉化為富馬酸、通過蘋果酸脫氫酶的作用使蘋果酸轉化為丙酮酸。
丙酮酸可通過三羧酸循環(huán)轉換為琥珀酸、蘋果酸、檸檬酸和延胡索酸。發(fā)酵蔬菜中乳酸菌與琥珀酸、草酸、檸檬酸、蘋果酸、酒石酸、乙酸的產(chǎn)生呈正相關,并且乳酸、蘋果酸、琥珀酸與乳桿菌和魏斯氏菌呈顯著的正相關。因此,有機酸主要通過EMP、HMP 及 TCA、同型乳酸發(fā)酵、異型乳酸發(fā)酵及相關酶的作用下生成。
③ 氨基酸的形成
氨基酸對酸筍的滋味起重要影響,谷氨酸和天冬氨酸是主要鮮味氨基酸,絲氨酸和甘氨酸是主要甜味氨基酸。發(fā)酵過程中,微生物以蛋白質為氮源,將蛋白質分解為多種氨基酸。酸筍中谷氨酸產(chǎn)生可能由4條代謝途徑產(chǎn)生:(1) L-吡咯啉-5-羧酸通過 δ-吡咯啉-5-羧酸酯脫氫酶轉化為 L-谷氨酸;(2)在谷氨酰胺酶催化作用下,谷氨酰胺轉化為谷氨酸;(3) TCA 中2-氧代戊二酸或 L-谷氨酰胺通過谷氨酸合酶轉化為谷氨酸;(4) 2-氧代戊二酸經(jīng)谷氨酸脫氫酶催化轉化為谷氨酸。同時,乳酸菌中含有天冬氨酸氨基轉移酶,以精氨酸為底物產(chǎn)生谷氨酸。此外,谷氨酸在酶的作用下轉換為其他氨基酸。例如,在吡咯啉-5-羧酸還原酶和甘氨酸羥甲基轉移酶的催化下,谷氨酸可被轉化為脯氨酸和絲氨酸,并且絲氨酸在甘氨酸羥甲基轉移酶作用下轉化為甘氨酸。
④ 揮發(fā)性風味物質的形成
對甲苯酚和吲哚等化合物作為酸筍中含量最高的揮發(fā)性風味物質,是賦予酸筍獨特臭味的重要特征風味之一。目前已報道的合成對甲苯酚的前體物質為酪氨酸,而吲哚類物質可由色氨酸轉化。乳酸菌可分泌大量的芳香氨基酸氨基轉移酶和吲哚脫氫酶,通過這些酶的作用,使色氨酸代謝生成一系列吲哚化合物。
酪氨酸的代謝途徑主要存在于厭氧的梭菌屬內,可通過氨基酸轉氨酶或組氨醇磷酸氨基轉化為4-羥基-苯丙酮酸,在4-羥基苯丙酮酸羧化酶作用下生成對羥基苯 乙酸,再轉化成對甲苯酚。另一方面,酪氨酸可在S-腺苷甲硫氨酸酶作用下生成對甲苯酚。對甲基苯酚與乳酸菌呈正相關,但與藍藻和明創(chuàng)珠菌呈負相關。
游離脂肪酸是酯、甲基酮、醛、仲醇和內酯的前體。乳酸菌自身含有細胞內酯酶,在發(fā)酵過程中會從裂解細胞中釋放出來參與水解脂類物質。酯酶可以將甘油酯和醇在水介質中發(fā)生醇解而合成酯。乙酸乙酯、丁酸乙酯、乳酸乙酯、己酸乙酯和乙酸丙酯是酸筍中主要特征芳香酯類物質。
傳統(tǒng)發(fā)酵食品中酯類物質可通過脂肪酶、醇脫氫酶和醇酰基轉移酶催化作用下形成,其中乙酸酯類主要是由脂肪酶和醇?;D移酶催化合成。同時,乙醇脫氫酶可以將醇催化成醛,再氧化成脂肪類酯。醛類物質主要由游離氨基酸通過 Ehrlich 途徑降解轉化。例如 3-甲基丁醛、2-甲基丁醛和 2-甲基丙醛分別由亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸在轉氨酶和脫羧酶作用下轉化而來。另一方面,不飽和脂肪酸是直鏈醛的前體物質,如己醛是亞油酸的氧化產(chǎn)物。呋喃類物質也是主要由亞油酸被氧化后產(chǎn)生,其閾值低,且是一種具有蔬菜芳香的物質。
參考資料:
[1]馮浩森,李湘鑾,馮愛軍,等.酸筍微生物與風味形成研究進展[J].食品安全質量檢測學報,2023,14(22):91-99.
[2]薛冰潔,胡榮,吳良如,等.酸筍中微生物區(qū)系演替和風味物質形成機制的研究進展[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2024,50(04):315-321.
作者簡介:小泥沙,食品科技工作者,食品科學碩士,現(xiàn)就職于國內某大型藥物研發(fā)公司,從事營養(yǎng)食品的開發(fā)與研究。
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